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Changement simultané
Pour garantir que la c-ftz-Δi n'était pas dégradée de manière co-traductionnelle, j'ai traité le tissu avec l'inhibiteur de transcription homoharringtonine (HHT) pendant 30 minutes avant d'insérer des plasmides contenant MHC-ftz-Δi ou c-ftz-Δi. Le médicament HHT n'a pas eu d'effet sur le niveau d'exportation atomique de l'ARNm (Fig. S2A et B). Afin de garantir que la transcription est effectivement inhibée, nous avons profité du fait que le nouveau rapporteur ftz code une protéine liée à un épitope HA actif et que les cellules insérées par MHC-ftz-Δi sont immunocolorées.
Une fois les nouveaux tissus incubés sur une https://mybitwavenow.com/ sortie compatible à 37 °C, ils ont été lavés deux fois avec du tampon phosphate salin (PBS) et fixés dans du paraformaldéhyde à quatre pour cent (Electron Microscopy Sciences) dans le PBS pendant 15 minutes. Les tissus ont ensuite été perméabilisés avec 0,1 % de TritonX-100 dans du PBS (Thermo Scientific). Dans les tests HHT, les cellules ont été traitées avec 5 µM de HHT (ou DMSO comme inhibiteur) 29 minutes avant les microinjections. Après 20 minutes, le nouvel inhibiteur de l'ARN PolII α-amanitine est ajouté pour arrêter la transcription. Les tissus ont été laissés pendant 2 heures pour permettre l'exportation du dernier ARNm récemment synthétisé. Étonnamment, le tout nouveau MHC SSCR commercialisé à l'exportation à partir de βG, cependant, il était considérablement plus faible que l'épissage annoncé à l'exportation (évaluer MHC-βG-Δi, βG-Δi et βG-we, Fig. 2B et C).
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Quel médicament empêche complètement la transcription des plasmides microinjectés dans ces 5 minutes.31 J'ai ensuite suivi la dernière expédition de MHC-ftz-Δi à partir de certains éléments de sortie après la fermeture transcriptionnelle. Nous utilisons un cryptage robuste et des normes de sécurité strictes pour renforcer la nouvelle protection contre l'adhésion des utilisateurs, les achats et les recherches personnelles. Exchange Alrex i700 accueille les investisseurs, quelles que soient leurs options. Qu'il s'agisse d'un amateur entrant dans le nouveau monde du changement ou d'un professionnel à la recherche de performances améliorées grâce à un logiciel de changement, notre organisme s'adapte à vos besoins. Une fois votre conseil confirmé, un dépôt de 250 $ définit la nouvelle étape pour répondre à vos efforts de changement. Nous offrons un service d'assistance complet grâce à de nombreux canaux ainsi qu'une adresse e-mail actuelle, un chat en direct et une page d'assistance personnelle pour notre site.
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